Cassification
技術(shù)文章/ Technical Articles
在進(jìn)行低氧或高氧培養(yǎng)時(shí),確保細(xì)胞的存活率和生長(zhǎng)效率需要考慮以下幾個(gè)關(guān)鍵因素:
1. 精確控制氣體濃度:使用三氣培養(yǎng)箱可以精確控制氧氣和二氧化碳的濃度。例如,Thermo Scientific 的 HERAcell 三氣培養(yǎng)箱能夠提供接近機(jī)體內(nèi)環(huán)境的培養(yǎng)條件,專為優(yōu)化哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)設(shè)計(jì),能夠提供完善的低氧環(huán)境,以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞更快、更健康地生長(zhǎng) 。
2. 細(xì)胞類型和培養(yǎng)階段:不同的細(xì)胞類型對(duì)氧氣和二氧化碳的濃度有不同的需求。例如,某些細(xì)胞在低氧條件下(如1%-5% O2)可能表現(xiàn)出更好的生長(zhǎng)和分化,而其他細(xì)胞可能需要更高的氧氣濃度。在培養(yǎng)的不同階段,細(xì)胞對(duì)氣體的需求也可能發(fā)生變化。
3. 溫度和pH值:維持適宜的溫度和pH值對(duì)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)至關(guān)重要。大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)需要在36°C至37°C的溫度下進(jìn)行,且pH值通常維持在7.4左右。使用基于CO2-碳酸氫鹽的緩沖液緩沖的培養(yǎng)基時(shí),需要使用外源性CO2來維持pH值 。
4. 避免污染:細(xì)胞培養(yǎng)過程中要嚴(yán)格無菌操作,避免細(xì)菌、真菌或支原體的污染,這些都會(huì)對(duì)細(xì)胞的存活率和生長(zhǎng)效率產(chǎn)生負(fù)面影響。
5. 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和血清:培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活至關(guān)重要。需要確保培養(yǎng)基中的成分新鮮且未被破壞,且血清的質(zhì)量良好。
6. 細(xì)胞密度和傳代:細(xì)胞接種的密度和傳代的頻率也會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。過高的細(xì)胞密度或過于頻繁的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞應(yīng)激和生長(zhǎng)減緩。
7. 監(jiān)測(cè)和調(diào)整:定期監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和培養(yǎng)條件,及時(shí)調(diào)整氣體濃度、更換培養(yǎng)基和進(jìn)行必要的操作,以確保細(xì)胞的最佳生長(zhǎng)環(huán)境。
通過上述措施,可以在低氧或高氧培養(yǎng)條件下優(yōu)化細(xì)胞的存活率和生長(zhǎng)效率。
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